品 名:链霉(mei)亲(qin)和素琼脂(zhi)糖(tang)凝胶FF
英文名:Streptavidin NUPharose Fast Flow, Streptavidin NUPharose FF
目录号:NRPB41L、NRPB41S(预装柱)
规 格:20 ml,100 ml,1L,1 ml预装柱,5 ml预装柱,特殊规格订制
运 输:2 ~ 25℃,常压、避光
贮 存:20%乙醇,2 ~ 8℃
保质期:3年
相关介绍:
链霉亲(qin)和(he)素琼(qiong)(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)胶FF是一(yi)种将链霉亲(qin)和(he)素(Streptavidin)键合在琼(qiong)(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)胶微球上形成的(de)生物亲(qin)和(he)层析(xi)分(fen)离介(jie)质。该产品保留了琼(qiong)(qiong)脂(zhi)糖(tang)极好(hao)(hao)的(de)亲(qin)水(shui)性(xing)及大网架结(jie)构,与生物活性(xing)大分(fen)子有很(hen)好(hao)(hao)的(de)相容性(xing),具有载量高,非特(te)(te)异性(xing)吸附少,流(liu)速快(kuai)等(deng)特(te)(te)点。
链(lian)(lian)霉亲和(he)(he)(he)素(su)琼脂糖凝胶(jiao)FF是基(ji)于(yu)链(lian)(lian)霉亲和(he)(he)(he)素(su)与生(sheng)物素(su)的(de)(de)特异性(xing)结合(he)实(shi)现(xian)从生(sheng)物样品(pin)或混(hun)合(he)物中分离纯化(hua)生(sheng)物素(su)或生(sheng)物素(su)化(hua)的(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)、抗(kang)(kang)(kang)体(ti)、核酸(suan)等物质。由于(yu)链(lian)(lian)霉亲和(he)(he)(he)素(su)与生(sheng)物素(su)的(de)(de)结合(he)力非常(chang)强,一般需要变性(xing)条件下才能(neng)将(jiang)其分离,这容易导致样品(pin)或配基(ji)失活。这个特性(xing)可用(yong)于(yu)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)与抗(kang)(kang)(kang)体(ti)的(de)(de)分离,如将(jiang)生(sheng)物素(su)化(hua)的(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)体(ti)结合(he)在凝胶(jiao)上,然后利用(yong)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)抗(kang)(kang)(kang)体(ti)的(de)(de)亲和(he)(he)(he)特性(xing)纯化(hua)无生(sheng)物素(su)化(hua)的(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan),抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)洗(xi)脱时抗(kang)(kang)(kang)体(ti)不会被(bei)洗(xi)脱。反之亦可。
另外(wai),链霉亲和(he)(he)素与2-亚氨(an)基生(sheng)物(wu)素(2-iminobiotin)的(de)结合相(xiang)对生(sheng)物(wu)素较(jiao)弱,在pH 9.5 ~ 11.0时容易结合,pH 4.0时不需(xu)要变性(xing)剂即可(ke)洗脱,一(yi)般不影(ying)响样品(pin)的(de)活性(xing)和(he)(he)凝胶的(de)活性(xing)。
技术指标:
基质(zhi) | 4%琼脂糖凝(ning)胶微球 |
配基 | 链霉亲(qin)和(he)素 |
配基密度 | ~5 mg/ml |
填料粒径 | 60 ~ 180 μm |
最大(da)流速 | 800 cm/h |
推荐(jian)流速 | 15 ~ 100 cm/h |
pH稳定性 | 短时间pH 2 ~ 11;长时间pH 4 ~ 9 |
耐反压 | 0.3 MPa |
载量(liang) | ≥300 nmol/ml生物素 ≥6 mg/ml生(sheng)物素(su)化蛋白 |
使用方法:
1 推荐缓冲液
1.1 纯化生物素或生物素化物质
结合缓冲液:20 mM NaH2PO4, 150 mM NaCl, pH 7.4
洗脱缓冲液:8 M 盐酸胍,pH 1.5
1.2 纯(chun)化2-亚(ya)氨(an)基(ji)生(sheng)(sheng)物(wu)素(su)或2-亚(ya)氨(an)基(ji)生(sheng)(sheng)物(wu)素(su)标记的(de)物(wu)质
结合缓冲液:50 mM 碳酸(suan)铵,500 mM NaCl,pH 10.0
洗脱缓冲液:50 mM 乙酸铵,500 mM NaCl,pH 4.0
1.3 纯化抗(kang)原或(huo)抗(kang)体
结合缓冲液:20 mM NaH2PO4,150 mM NaCl,pH 7.4
洗脱(tuo)缓冲液:100 mM 甘氨酸-盐酸,pH 3.0
注:用于(yu)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)化(hua)的抗体(ti)纯(chun)(chun)(chun)化(hua)未生(sheng)物(wu)(wu)素(su)化(hua)的抗原(或(huo)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)化(hua)的抗原纯(chun)(chun)(chun)化(hua)未生(sheng)物(wu)(wu)素(su)化(hua)的抗体(ti))有2种方法,①可(ke)先在(zai)游离状(zhuang)态下抗原与抗体(ti)结合,然(ran)后当(dang)样(yang)品纯(chun)(chun)(chun)化(hua)即可(ke);②也可(ke)以将生(sheng)物(wu)(wu)素(su)化(hua)的抗体(ti)(或(huo)抗原)先结合柱上,然(ran)后对应的未生(sheng)物(wu)(wu)素(su)化(hua)的抗原(或(huo)抗体(ti))当(dang)样(yang)品纯(chun)(chun)(chun)化(hua)。
2 样品准备
上(shang)柱的样品(pin)应尽(jin)量保持与结合缓(huan)冲液(ye)一致(zhi)。通(tong)常可用透析、超滤、稀释等方法处理样品(pin)。并(bing)且上(shang)柱前应过(guo)0.45 μm滤膜或高速离心去除不溶物(wu)。
3 样品纯化
3.1 取适(shi)量(liang)的链霉(mei)亲和素琼脂糖凝(ning)胶FF装入合(he)适(shi)的层析柱中,用结(jie)合(he)缓冲液平衡5个柱体积(ji),建议流速为100 cm/h。
3.2 将准备好(hao)的样(yang)品缓慢(man)上柱,为保证样(yang)品与链(lian)霉亲和素充分结合,应控(kong)制好(hao)上样(yang)流速,建(jian)议流速为15 ~ 50 cm/h。
3.3 上样后用(yong)结合缓冲液平衡(heng)10个柱(zhu)体积(ji)以(yi)上,或平衡(heng)至基线(xian),洗去杂质,推(tui)荐流速为100 cm/h。
3.4 用洗脱缓(huan)冲液(ye)洗10 ~ 20个柱(zhu)体(ti)积,建议流(liu)速为(wei)100 cm/h,收集的(de)洗脱液(ye)应立即调节pH至稳定(ding)范围,并根据需要置换缓(huan)冲液(ye)。
3.5 洗脱(tuo)目的(de)蛋白(bai)后的(de)柱子应立(li)即用中性的(de)结合缓冲液平衡,并用20%乙醇(chun)保存柱子,或(huo)进行(xing)下一(yi)次纯化。
导购指南
中文名 | 英文简称 | 货(huo)号 | 规(gui)格 | 产品描述(shu) |
重力预装柱 | ||||
链霉亲和(he)素(su)琼脂糖凝胶FF重力(li)预装柱 | Streptavidin NUPharose FF pre-packed column | NRPB41S-Z11 | 1*1mL | 1支*1ml |
NRPB41S-Z41 | 4*1mL | 4支*1ml | ||
NRPB41S-Z15 | 1*5mL | 1支(zhi)*5mL | ||
NRPB41S-Z25 | 2*5mL | 2支*5mL | ||
AKTA中压预装柱 | ||||
链霉亲和素(su)琼(qiong)脂糖(tang)凝胶FF中(zhong)压(ya)预装(zhuang)柱(zhu) | Streptavidin NUPharose FF pre-packed column | NRPB41S-Y11 | 1*1mL | 1支*1ml |
NRPB41S-Y41 | 4*1mL | 4支*1ml | ||
NRPB41S-Y15 | 1*5mL | 1支*5mL | ||
NRPB41S-Y25 | 2*5mL | 2支*5mL | ||
填料 | ||||
链(lian)霉亲和素琼脂糖凝胶FF | Streptavidin NUPharose FF | NRPB41L-10 | 10mL | 1瓶*10ml |
NRPB41L-20 | 20mL | 1瓶(ping)*20ml | ||
NRPB41L-100 | 100mL | 1瓶*100ml | ||
NRPB41L-500 | 500ml | 1瓶*500ml | ||
注:纽龙生物填料体积为实(shi)际琼脂糖凝胶体积 |