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NRPB56L GST-琼脂糖凝胶4B

发布日期:2018-10-27 阅读次数:7994

品  名:GST-琼脂糖凝(ning)胶4B

英文名:Glutathione NUPharose 4B

目录号:NRPB56L、NRPB56S(预装柱)

规  格:20 ml,100 ml,1L,1 ml预(yu)装(zhuang)柱(zhu),5 ml预(yu)装(zhuang)柱(zhu),特殊规格订(ding)制

运  输:2 ~ 30℃,常压(ya)、避光

贮  存:20%乙醇,2~8℃

保质期:3年


相关介绍:

GST-琼脂(zhi)糖凝(ning)胶4B是一(yi)种(zhong)将谷(gu)(gu)胱(guang)甘肽(tai)键合(he)在琼脂(zhi)糖凝(ning)胶微球上形成的生物(wu)亲和层析分(fen)(fen)离介(jie)质(zhi),主要用于谷(gu)(gu)胱(guang)甘肽(tai)转移酶标记蛋(dan)白(GST融合(he)蛋(dan)白)、谷(gu)(gu)胱(guang)甘肽(tai)转移酶和谷(gu)(gu)胱(guang)甘肽(tai)依赖蛋(dan)白的分(fen)(fen)离纯化(hua),通过一(yi)步(bu)亲和层析,就能(neng)获得高(gao)纯度的蛋(dan)白。与(yu)GST-琼脂(zhi)糖凝(ning)胶FF相比,GST-琼脂(zhi)糖凝(ning)胶4B能(neng)获得更高(gao)的载量。


技术指标:

基质

4%高度交(jiao)联琼脂糖凝胶

谷(gu)胱甘肽

密度

20μmol/ml

填料(liao)粒径

60~180 μm

蛋白质(zhi)载量

25mg谷胱(guang)甘肽-S-转移酶(28kDa)/ml

最大流速

100 cm/h

推荐流速

10~50 cm/h

0.1 MPa

pH稳(wen)定性

3-12(长时间);3-13(短时间)

化学稳(wen)定性

在以下溶液(ye)中稳定:常用的水相缓(huan)冲(chong)液(ye);0.1mol/L NaOH6mol/L盐酸胍;70%乙(yi)醇。


使用方法:

1. 装柱

1.1 根(gen)据分离目标性质配制初(chu)始缓(huan)冲液(平衡液)和(he)洗脱缓(huan)冲液。

1.2 将凝胶抽干,并用蒸馏水洗涤2次去除(chu)保存(cun)的乙醇,用蒸馏水配成匀浆并脱气。

1.3 将层析柱垂直固(gu)定,底端用水(shui)或缓(huan)冲液润湿(shi)并(bing)保持一段液位。

1.4 用玻璃棒引导(dao)匀浆沿着柱内壁一次性(xing)倒入柱内,使凝(ning)胶在柱内自由沉降(jiang)。

1.5 连结好柱(zhu)(zhu)(zhu)子(zi)顶端活动(dong)柱(zhu)(zhu)(zhu)头(tou),打开蠕动(dong)泵,让缓(huan)冲液用(yong)使(shi)用(yong)时操作流(liu)速(su)流(liu)过(guo)5柱(zhu)(zhu)(zhu)体(ti)积(ji)(ji),再使(shi)用(yong)1.5倍的操作流(liu)速(su)流(liu)过(guo)5柱(zhu)(zhu)(zhu)体(ti)积(ji)(ji),调(diao)节适配柱(zhu)(zhu)(zhu)头(tou),使(shi)其(qi)尽(jin)量贴近胶面,最后用(yong)2-3倍柱(zhu)(zhu)(zhu)体(ti)积(ji)(ji)的缓(huan)冲液平衡(heng)柱(zhu)(zhu)(zhu)子(zi)。

注意:(1)所有操作过程(cheng)不能(neng)引(yin)入(ru)气(qi)(qi)泡,保证装胶的(de)均匀度。(3)如无条件(jian)做(zuo)1.2,填料层有气(qi)(qi)泡,可(ke)进行(xing)2次装柱,去除保存的(de)乙醇和气(qi)(qi)泡。(4)乙醇等(deng)试剂配制(zhi)的(de)溶液需要(yao)脱气(qi)(qi)。

2. 平衡

将平(ping)衡缓冲(chong)液以操作(zuo)流(liu)速平(ping)衡层(ceng)析柱,观察检测器(qi)的变(bian)(bian)化,直到(dao)电导、pH等参数不变(bian)(bian)。推(tui)荐的结合(he)平(ping)衡缓冲(chong)液为:10mM PBS (140mM NaCl, 2.7mM KCl, 10mM Na2HPO4, 1.8mM KH2PO4, pH 7.4)。

3. 上样

切换转换阀进行(xing)上(shang)(shang)样(yang),上(shang)(shang)样(yang)量根(gen)据(ju)样(yang)品的性质和层(ceng)析介质的量进行(xing)选(xuan)择,也可进行(xing)线性实(shi)验(yan)找到最(zui)佳上(shang)(shang)样(yang)量;样(yang)品的预处理:置换缓(huan)冲液(ye),澄清过滤(0.45、0.22μm)等。

4. 冲洗

用2-3个柱(zhu)体积的平衡(heng)缓冲液冲洗上(shang)样后的层析柱(zhu),观察(cha)检测器的变化,直到(dao)电导、pH等(deng)参数不变,此时未交(jiao)换(huan)的组分被(bei)清(qing)洗出去。

5. 洗脱

一般推(tui)荐用10mM还(hai)原型谷胱甘肽溶液(可含缓冲成分)进行(xing)洗脱。推(tui)荐的洗脱缓冲液为:50mM Tris-HCl, 10 mM 还(hai)原型谷胱甘肽(GSH), pH 8.0。

6. 再生

用蒸(zheng)馏水按操(cao)作流速冲(chong)洗(xi)3-5个柱(zhu)体(ti)积(ji),接(jie)着用平衡液洗(xi)到平衡3-5个柱(zhu)体(ti)积(ji)。

若(ruo)有失(shi)活蛋(dan)白质或脂类物质在(zai)再生时洗不掉(diao),可用(yong)在(zai)位清洗(CIP)除(chu)去。

7. 在位(wei)清洗(CIP)

去除沉淀(dian)和(he)变性(xing)蛋白:用(yong)2CV 6M盐酸胍(gua)清洗,立即用(yong)10mM PBS(pH7.4)洗5CV。

去除强疏(shu)水蛋白:用3-4CV 70%乙醇清(qing)洗(xi),立(li)即(ji)用10mM PBS(pH7.4)洗(xi)5CV。

推(tui)荐流速

预装柱体积(ml

1

5

10

流速(ml/min

0.2

1

2

导购指南


中(zhong)文名(ming)

英(ying)文简称

货号

规格

产品描述

重(zhong)力(li)预(yu)装(zhuang)柱

GST-琼脂(zhi)糖凝胶4B重力预装柱

GST NUPharose 4B pre-packed column

NRPB56S-Z11

1*1mL

1支*1ml

NRPB56S-Z41

4*1mL

4支(zhi)*1ml

NRPB56S-Z15

1*5mL

1*5mL

NRPB56S-Z25

2*5mL

2支(zhi)*5mL

AKTA中压预装柱

GST-琼脂(zhi)糖凝胶4B中压预装柱

GST NUPharose 4B pre-packed column

NRPB56S-Y11

1*1mL

1支(zhi)*1ml

NRPB56S-Y41

4*1mL

4支*1ml

NRPB56S-Y15

1*5mL

1*5mL

NRPB56S-Y25

2*5mL

2支*5mL

填料

GST-琼脂糖凝胶4B

GST NUPharose 4B

NRPB56L-10

10mL

1瓶*10ml

NRPB56L-20

20mL

1瓶*20ml

NRPB56L-100

100mL

1瓶(ping)*100ml

NRPB56L-500

500ml

1瓶*500ml

注:纽龙(long)生物填料体积为实际琼脂(zhi)糖凝胶(jiao)体积


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