相关介绍： 

辛(xin)基-琼(qiong)脂糖凝(ning)胶FF是(shi)一(yi)种将(jiang)辛(xin)基键合(he)在(zai)琼(qiong)脂糖微球上形成的(de)中等疏水(shui)性(xing)(xing)疏水(shui)层析分离(li)介质(zhi)。该产品保留了琼(qiong)脂糖极好(hao)的(de)亲水(shui)性(xing)(xing)及大网架结构，与(yu)生(sheng)物活性(xing)(xing)大分子有(you)很(hen)好(hao)的(de)相(xiang)容性(xing)(xing)，具有(you)离(li)子交换容量高，非特异性(xing)(xing)吸(xi)附少，流速快等特点，广泛用(yong)于具有(you)一(yi)定疏水(shui)性(xing)(xing)能(neng)的(de)蛋白(bai)质(zhi)、多肽(tai)等生(sheng)物大分子实验室规模制(zhi)备和生(sheng)物制(zhi)药、生(sheng)物工(gong)(gong)程的(de)工(gong)(gong)业化制(zhi)备。

典型应用如重组人(ren)(ren)粒巨噬细胞(bao)集落刺(ci)激(ji)(ji)因(yin)子(zi)(GM-CSF)、粒细胞(bao)集落刺(ci)激(ji)(ji)因(yin)子(zi)(G-CSF)、人(ren)(ren)集落刺(ci)激(ji)(ji)因(yin)子(zi)(M-CSF)、表皮生(sheng)成因(yin)子(zi)(EGF)、生(sheng)长激(ji)(ji)素(su)（GH）的生(sheng)产以及单克隆(long)抗体的纯化。

技术指标：

使用方法：

　　1. 装柱

　　1.1 根据(ju)分离目标(biao)性质配制初(chu)始缓冲(chong)液(ye)（平(ping)衡液(ye)）和洗脱缓冲(chong)液(ye)。

　　1.2 将凝胶(jiao)抽干(gan)，并(bing)(bing)用(yong)(yong)蒸(zheng)馏水(shui)洗涤2次去除保(bao)存的乙醇，用(yong)(yong)蒸(zheng)馏水(shui)配(pei)成匀浆并(bing)(bing)脱气。

　　1.3 将层析柱垂直固定，底端用水或缓(huan)冲液润湿并保持一(yi)段(duan)液位(wei)。

　　1.4 用(yong)玻璃棒引导匀浆沿着柱内(nei)壁一次性倒(dao)入柱内(nei)，使(shi)凝胶在柱内(nei)自由沉降。

　　1.5 连(lian)结好(hao)柱(zhu)(zhu)子顶端(duan)活动柱(zhu)(zhu)头，打(da)开蠕动泵，让缓冲(chong)液用使用时操作(zuo)流(liu)速流(liu)过5柱(zhu)(zhu)体(ti)积，再使用1.5倍(bei)的(de)(de)操作(zuo)流(liu)速流(liu)过5柱(zhu)(zhu)体(ti)积，调节(jie)适配(pei)柱(zhu)(zhu)头，使其尽量贴近胶面，最后(hou)用2 ~ 3倍(bei)柱(zhu)(zhu)体(ti)积的(de)(de)缓冲(chong)液平(ping)衡柱(zhu)(zhu)子。

注意：

1)所有操作(zuo)过程不能(neng)引入气(qi)泡，保证装(zhuang)胶的均匀(yun)度。

2)如无条件做1.2，填料层有气(qi)泡，可进行2次装柱，去除保存的乙醇和气(qi)泡。

3)乙(yi)醇等试剂配制的溶液需要脱气。

　　2. 平衡

　　将平(ping)衡缓冲液(ye)以操作流速平(ping)衡层析柱，观(guan)察(cha)检测器的变化(hua)，直到电导、pH等(deng)参数不(bu)变。

　　3. 上样

　　切换转(zhuan)换阀进(jin)(jin)行(xing)上样，上样量根据样品的(de)(de)性(xing)质和(he)层析介质的(de)(de)量进(jin)(jin)行(xing)选择，也可进(jin)(jin)行(xing)线性(xing)实验找到最佳上样量；样品的(de)(de)预处理：置换缓冲液，加盐，澄清过滤(lv)（0.45、0.22 μm）等。

　　4. 冲洗

　　用2 ~ 3个柱体积的(de)平衡缓冲(chong)液(ye)冲(chong)洗(xi)上(shang)样(yang)后(hou)的(de)层析柱，观察检测(ce)器的(de)变化，直到电导、pH等(deng)参(can)数不变，此时(shi)未交换的(de)组分被清洗(xi)出去。

　　5. 洗脱

　　疏水层(ceng)析柱(zhu)的(de)洗(xi)(xi)脱(tuo)可用(yong)恒(heng)定(ding)洗(xi)(xi)脱(tuo)、梯度(du)洗(xi)(xi)脱(tuo)或者阶跃(yue)洗(xi)(xi)脱(tuo)，一般推荐(jian)降低(di)盐浓度(du)的(de)梯度(du)洗(xi)(xi)脱(tuo)进(jin)行。亦可根据实际(ji)情况，添加有机溶(rong)剂进(jin)行洗(xi)(xi)脱(tuo)。

　　6. 再生

　　用(yong)蒸馏(liu)水(shui)按操(cao)作(zuo)流(liu)速冲洗3 ~ 5个柱体(ti)积，接着用(yong)平衡液洗到平衡3 ~ 5个柱体(ti)积。

　　若有(you)失活蛋白质或脂类物(wu)质在再生时(shi)洗不掉(diao)，可(ke)用在位清洗（CIP）除(chu)去。

　　7. 在(zai)位清洗(CIP)

　　对于强结合蛋白(bai)质或(huo)脂(zhi)类(lei)物质，可采用以(yi)下流程进行在位清洗：1 mol/L NaOH洗2个(ge)柱(zhu)体(ti)积，8 mol/L尿素洗2个(ge)柱(zhu)体(ti)积， 30%异(yi)丙醇洗2个(ge)柱(zhu)体(ti)积，平衡缓冲(chong)液(ye)洗2个(ge)柱(zhu)体(ti)积。

　　在(zai)位(wei)清(qing)洗可(ke)有(you)效(xiao)去除介质(zhi)上(shang)的杂质(zhi)，反(fan)向效(xiao)果更佳。如需要去除内毒(du)素热原，可(ke)以(yi)在(zai)50 cm/h速度下，1 mol/L NaOH清(qing)洗1 ~ 2 h。

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