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NRPB33S 丁基-琼脂糖凝胶FF预装柱

发(fa)布日期(qi):2018-10-27 阅(yue)读(du)次数(shu):6707

品  名:丁基-琼脂糖凝(ning)胶FF

英文名:Butyl NUPharose Fast Flow, Butyl NUPharose FF

目录号:NRPB33L、NRPB33S(预装柱)

规  格:20 ml,100 ml,1L,1 ml预(yu)装柱,5 ml预(yu)装柱,特殊规格订(ding)制

运  输:2 ~ 25℃,常压、避光(guang)

贮  存:20%乙醇,2 ~ 25℃

保质期:5年


相关介绍: 

丁(ding)基(ji)(ji)-琼脂(zhi)糖(tang)凝(ning)胶FF是一(yi)种将丁(ding)基(ji)(ji)键合在琼脂(zhi)糖(tang)凝(ning)胶微球上形成的较弱疏(shu)水性(xing)(xing)疏(shu)水层析分(fen)离介质(zhi)。该产品保留了琼脂(zhi)糖(tang)极好的亲水性(xing)(xing)及大网(wang)架结构,与生(sheng)(sheng)物活性(xing)(xing)大分(fen)子(zi)有很(hen)好的相(xiang)容性(xing)(xing),具有载量高(gao),非特(te)异性(xing)(xing)吸附少,流速(su)快等特(te)点,广泛用于(yu)具有一(yi)定(ding)疏(shu)水性(xing)(xing)能的蛋白质(zhi)、多肽等生(sheng)(sheng)物大分(fen)子(zi)实(shi)验室规模制备和(he)生(sheng)(sheng)物制药、生(sheng)(sheng)物工程的工业化制备。


典型应用如重组人粒巨噬细(xi)胞(bao)集(ji)落(luo)(luo)刺激因(yin)子(GM-CSF)、粒细(xi)胞(bao)集(ji)落(luo)(luo)刺激因(yin)子(G-CSF)、人集(ji)落(luo)(luo)刺激因(yin)子(M-CSF)、表皮生成因(yin)子(EGF)、生长激素(su)(GH)的生产以及单克隆抗体(ti)的纯化。


技术指标:

外观

乳(ru)白(bai)色半透明凝(ning)胶状微球

基质

4%交联琼脂糖

配体

4碳链;-(CH2)3CH3

配体密度

50 μmol/mL

蛋白质载量(liang)

30 mg BSA/mL

最大流速

800 cm/h

推荐流速

100 cm/h

粒(li)径范围

60 ~ 180μm

耐反(fan)压

0.3 MPa

工作(zuo)温度

4 ~ 40℃

耐热

pH 7水中,120℃灭菌30 min

pH稳(wen)定(ding)性(xing)

3 ~ 13(长时间);2 ~ 14(短时(shi)间)

化学(xue)稳定性

在以下溶液中稳定:常用的水相缓冲液;1 mol/L氢氧化钠;8 mol/L尿(niao)素(su);6 mol/L盐(yan)酸胍;70%乙(yi)醇(chun)。

使用方法:

  1. 装柱

  1.1 根据分(fen)离目标性质配制初始缓(huan)冲液(ye)(ye)(平衡液(ye)(ye))和洗脱缓(huan)冲液(ye)(ye)。

  1.2 将凝胶抽干,并用蒸馏水洗涤2次去除(chu)保存(cun)的乙醇,用蒸馏水配成(cheng)匀(yun)浆并脱气。

  1.3 将层(ceng)析柱垂直固(gu)定,底端用(yong)水或缓冲液润湿并保持(chi)一段液位。

  1.4 用玻璃棒引(yin)导匀浆沿着柱(zhu)内壁一次性倒入柱(zhu)内,使凝胶在柱(zhu)内自由沉降。

  1.5 连(lian)结好(hao)柱(zhu)子顶端活动柱(zhu)头,打开蠕动泵,让缓冲液用(yong)使(shi)用(yong)时操作流速(su)流过(guo)5柱(zhu)体(ti)积,再使(shi)用(yong)1.5倍(bei)的操作流速(su)流过(guo)5柱(zhu)体(ti)积,调节(jie)适配(pei)柱(zhu)头,使(shi)其尽量(liang)贴近胶面,最(zui)后用(yong)2 ~ 3倍(bei)柱(zhu)体(ti)积的缓冲液平(ping)衡柱(zhu)子。


注意:

1)所有(you)操作过程不能引(yin)入气泡(pao),保(bao)证装(zhuang)胶的均匀(yun)度。

2)如(ru)无条件做1.2,填(tian)料(liao)层有气泡,可进(jin)行2次装柱,去除保存的乙(yi)醇和气泡。

3)乙醇等试剂(ji)配制的(de)溶液需要脱气。

  2. 平衡

  将(jiang)平衡缓冲液以操作流速平衡层(ceng)析(xi)柱,观察检测器的变化,直到(dao)电导(dao)、pH等(deng)参(can)数不变。

  3. 上样

  切换(huan)转换(huan)阀进行上样(yang),上样(yang)量(liang)根据样(yang)品的性质(zhi)(zhi)和层析介质(zhi)(zhi)的量(liang)进行选择(ze),也可(ke)进行线性实验找到最佳上样(yang)量(liang);样(yang)品的预处理:置(zhi)换(huan)缓冲液,加盐(yan),澄清(qing)过滤(0.45、0.22 μm)等。

  4. 冲洗

  用(yong)2 ~ 3个柱(zhu)体积(ji)的平衡缓冲(chong)液冲(chong)洗(xi)上样后的层析柱(zhu),观察检测(ce)器的变化,直到电导、pH等(deng)参数不变,此时未交换的组分被清洗(xi)出去(qu)。

  5. 洗脱

  疏(shu)水层析柱的洗(xi)脱(tuo)(tuo)可用恒定(ding)洗(xi)脱(tuo)(tuo)、梯度(du)洗(xi)脱(tuo)(tuo)或者阶(jie)跃(yue)洗(xi)脱(tuo)(tuo),一般推(tui)荐降低(di)盐浓度(du)的梯度(du)洗(xi)脱(tuo)(tuo)进(jin)行。亦可根(gen)据实际情况,添加有机溶剂进(jin)行洗(xi)脱(tuo)(tuo)。

  6. 再生

  用蒸馏水按操作流(liu)速冲洗3 ~ 5个柱(zhu)体积,接着(zhe)用平衡液(ye)洗到(dao)平衡3 ~ 5个柱(zhu)体积。

  若有(you)失活蛋白(bai)质或脂类物质在(zai)再(zai)生时洗不掉,可(ke)用(yong)在(zai)位清洗(CIP)除去。

  7. 在位清洗(CIP)

  对(dui)于强结合蛋白(bai)质或(huo)脂类物质,可采(cai)用以下流(liu)程进行(xing)在位清洗(xi):1 mol/L NaOH洗(xi)2个(ge)(ge)柱体积,8 mol/L尿素洗(xi)2个(ge)(ge)柱体积, 30%异(yi)丙醇洗(xi)2个(ge)(ge)柱体积,平衡缓冲液洗(xi)2个(ge)(ge)柱体积。

  在(zai)位清(qing)洗(xi)可有效(xiao)去除介(jie)质(zhi)上的杂质(zhi),反向效(xiao)果更佳。如(ru)需(xu)要去除内毒素热原,可以在(zai)50 cm/h速度下,1 mol/L NaOH清(qing)洗(xi)1 ~ 2 h。

导购指南

中文名

英文简称

货号(hao)

规格(ge)

产品(pin)描(miao)述

重力预(yu)装柱

丁基-琼脂糖凝胶FF重力预装柱

Butyl NUPharose FF pre-packed column

NRPB33S-Z11

1*1mL

1支*1ml

NRPB33S-Z41

4*1mL

4支*1ml

NRPB33S-Z15

1*5mL

1*5mL

NRPB33S-Z25

2*5mL

2支*5mL

AKTA中压预装柱

丁基-琼脂糖凝胶FF中压预(yu)装柱(zhu)

Butyl NUPharose FF pre-packed column

NRPB33S-Y11

1*1mL

1支*1ml

NRPB33S-Y41

4*1mL

4支*1ml

NRPB33S-Y15

1*5mL

1*5mL

NRPB33S-Y25

2*5mL

2支*5mL

填料

丁基-琼脂糖(tang)凝胶FF

Butyl NUPharose FF

NRPB33L-10

10mL

1瓶*10ml

NRPB33L-20

20mL

1瓶*20ml

NRPB33L-100

100mL

1瓶*100ml

NRPB33L-500

500ml

1瓶*500ml

注:纽龙生物(wu)填料体(ti)(ti)积(ji)为实(shi)际(ji)琼(qiong)脂糖凝胶(jiao)体(ti)(ti)积(ji)


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