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肝(gan)素-琼脂(zhi)(zhi)糖(tang)凝胶FF是一种将肝(gan)素键(jian)合在(zai)琼脂(zhi)(zhi)糖(tang)凝胶微球上形成的(de)生物(wu)亲和层析分离介质。该(gai)产(chan)品保留了琼脂(zhi)(zhi)糖(tang)极(ji)好(hao)的(de)亲水性(xing)及大(da)网架结构，与生物(wu)活性(xing)大(da)分子(zi)有(you)很好(hao)的(de)相容(rong)性(xing)，具有(you)载量高，非特(te)异性(xing)吸附少，流速快等特(te)点(dian)，主要用(yong)于凝血(xue)酶III、凝血(xue)因子(zi)、脂(zhi)(zhi)蛋白、酯酶、激素、干扰素等的(de)分离纯化。

技术指标：

使用方法：

　　1. 装柱

　　1.1 根据分离目(mu)标性质配(pei)制(zhi)初始缓冲(chong)液（平(ping)衡液）和洗脱缓冲(chong)液。

　　1.2 将凝胶抽干，并(bing)用蒸馏水洗涤2次去除保存(cun)的乙醇，用蒸馏水配成(cheng)匀浆并(bing)脱气。

　　1.3 将层析柱垂直固定，底端(duan)用水或缓冲(chong)液润湿并保(bao)持一(yi)段液位。

　　1.4 用玻璃棒引导匀(yun)浆沿着(zhe)柱(zhu)内(nei)壁一次性倒入(ru)柱(zhu)内(nei)，使凝胶在柱(zhu)内(nei)自由沉降。

　　1.5 连(lian)结好(hao)柱(zhu)(zhu)子顶(ding)端活动(dong)柱(zhu)(zhu)头，打开蠕动(dong)泵，让(rang)缓冲(chong)液用(yong)(yong)使(shi)用(yong)(yong)时(shi)操作流(liu)速流(liu)过(guo)5柱(zhu)(zhu)体积，再使(shi)用(yong)(yong)1.5倍的(de)操作流(liu)速流(liu)过(guo)5柱(zhu)(zhu)体积，调节(jie)适(shi)配柱(zhu)(zhu)头，使(shi)其尽量贴近胶面，最(zui)后(hou)用(yong)(yong)2 ~ 3倍柱(zhu)(zhu)体积的(de)缓冲(chong)液平衡(heng)柱(zhu)(zhu)子。

注意：

1)所有操作过程不(bu)能引(yin)入气泡(pao)，保证装胶的均匀度。

2)如(ru)无条件做1.2，填料层有气(qi)泡，可进(jin)行2次(ci)装柱，去除保存的(de)乙醇和气(qi)泡。

3)乙醇(chun)等试剂配(pei)制的溶液需(xu)要脱气(qi)。

　　2. 平衡

　　将平(ping)衡(heng)缓冲(chong)液(ye)以操作(zuo)流速平(ping)衡(heng)层析柱，观察(cha)检测(ce)器的变(bian)化(hua)，直到UV、pH、电导等参数不变(bian)。推(tui)荐(jian)的平(ping)衡(heng)缓冲(chong)液(ye)为：50 mM Tris-HCl，pH 8.0。

　　3. 上样

　　切(qie)换(huan)转换(huan)阀进(jin)行上样(yang)(yang)，上样(yang)(yang)量(liang)(liang)根据样(yang)(yang)品的性质和层析介质的量(liang)(liang)进(jin)行选择，也(ye)可(ke)进(jin)行线(xian)性实验(yan)找到最佳上样(yang)(yang)量(liang)(liang)；样(yang)(yang)品的预处理：置换(huan)缓冲液，澄清过滤（0.45、0.22 μm）等。

　　4. 冲洗

　　用(yong)2 ~ 3个柱体积的平衡缓(huan)冲液冲洗上样(yang)后的层析柱，观察检测器的变(bian)化(hua)，直(zhi)到UV、pH、电导等参数不变(bian)。

　　5. 洗脱

　　一般推荐用高盐(yan)溶液(ye)（可含缓(huan)(huan)冲成(cheng)分）进(jin)行洗(xi)脱，为获得较好的纯(chun)度，可以分梯度进(jin)行洗(xi)脱。推荐的洗(xi)脱缓(huan)(huan)冲液(ye)为：50 mM Tris-HCl，2 M NaCl，pH 8.0。

　　6. 再生

　　用蒸(zheng)馏水按(an)操作流速冲洗(xi)3 ~ 5个(ge)柱体积(ji)，接着用平衡液洗(xi)到平衡3 ~ 5个(ge)柱体积(ji)。

　　若有失活蛋白质(zhi)或脂类(lei)物质(zhi)在再生时洗不(bu)掉，可用在位(wei)清洗（CIP）除去。

　　7. 在位清洗(CIP)

　　对(dui)于(yu)强结合蛋白质(zhi)或(huo)脂类物质(zhi)，可采用以下流(liu)程进行在位清(qing)洗：0.1 mol/L NaOH洗2个柱体(ti)积，8 mol/L尿素洗2个柱体(ti)积，平衡(heng)缓冲液(ye)洗2个柱体(ti)积。

注意事项

导购指南