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NRPB13L 蛋白A/G琼脂糖凝胶FF

发布日期:2018-10-27 阅(yue)读(du)次数:8341

品  名:蛋白A/G琼脂糖(tang)凝胶FF

英文名:Protein A/G NUPharose Fast Flow, Protein AG NUPharose FF

目录号:NRPB13L、NRPB13S(预装柱)

规  格:20 ml,100 ml,1L,1 ml预装柱(zhu),5 ml预装柱(zhu),特殊规格定制

运  输:2 ~ 25℃,常压、避光(guang)

贮  存:20%乙醇,2 ~ 8℃

保质期:3年


相关介绍: 

蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)A蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)G琼(qiong)脂糖凝(ning)胶FF是(shi)将重(zhong)组蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)A蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)G融(rong)合(he)(he)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(r-PAG,NRPA14S)键合(he)(he)在琼(qiong)脂糖凝(ning)胶微(wei)球上形(xing)成的(de)亲(qin)和分离介质。与(yu)单独的(de)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)A或蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)G分离介质相比(bi),具有更宽广的(de)结(jie)合(he)(he)范围,可以与(yu)人的(de)所有IgG亚型、IgA、IgE、IgM结(jie)合(he)(he),但不能与(yu)小鼠的(de)IgA、IgM和血清(qing)白(bai)(bai)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)结(jie)合(he)(he),适(shi)合(he)(he)用(yong)于鼠IgG单抗(kang)的(de)提取和检测。同时融(rong)合(he)(he)后的(de)r-PAG降低对pH的(de)依赖,允许(xu)在pH5 ~ 8进(jin)行结(jie)合(he)(he)。


技术指标:

基质

4%交联琼脂糖凝胶微球

配基

蛋白A蛋(dan)白G融合(he)蛋白

配基密度

≥6 mg/ml

填(tian)料粒径

60 ~ 180 μm

最大流速(su)

800 cm/h

推荐流速

20 ~ 100 cm/h

pH稳定性(xing)

pH 3 ~ 9pH2 ~ 10(清洗)

耐反压

0.3 MPa

载量

 20 mg/ml IgG

保存条件

2 ~ 8℃保存于20%乙醇溶液中


应用举例:

结合缓冲液(ye):20 mM磷(lin)酸缓冲液(ye),150 mM NaCl,pH 7.4

洗脱(tuo)缓冲液:0.1 M Glycine-HCl缓冲液,pH 2.5

中和缓冲液:1 M Tris-HCl,pH 9.0

1)1 ml蛋白(bai)A蛋白(bai)G琼(qiong)脂糖(tang)凝(ning)胶FF预(yu)填柱(zhu)用5 ~ 10个柱(zhu)床体积的蒸馏水洗去保(bao)存液;

2)用结(jie)合缓(huan)冲(chong)液结(jie)合缓(huan)冲(chong)液平(ping)衡 5 ~ 10个柱床体积;

3)将3 ml兔多抗血清(qing)用结(jie)合缓冲液稀释到15 ml,0.45 μm滤(lv)膜过滤(lv)上(shang)样;

4)用结合缓冲液再(zai)洗 5 ~ 10个柱(zhu)床体积(ji);

5)用(yong)洗脱缓(huan)(huan)冲(chong)液洗脱抗体,收集洗脱峰,并用(yong)中(zhong)和缓(huan)(huan)冲(chong)液调节其(qi)pH至(zhi)中(zhong)性(xing);

6)目的抗体洗脱后(hou)用结合缓冲液清(qing)洗5 ~ 10个柱体积平衡柱子(zi);

7)分析洗脱下来的兔多(duo)抗。

种类

Species

亚型

Antibody Class

蛋白A

Protein A

蛋白G

Protein G

蛋白A蛋(dan)白G融合蛋白

Protein AG

 

 

 

Human

IgG1

IgG2

IgG3

IgG4

IgM

IgD

IgA

Fab

+++

+++

+

+++

+

-

+

+

+++

+++

+++

+++

-

-

-

+

+++

+++

+++

+++

+

-

+

+

 

小鼠(shu)

Mouse

IgG1

IgG2a

IgG2b

IgG3

IgM

+

+++

+++

+++

-

++

+++

+++

+++

-

++

+++

+++

+++

-

 

大鼠

Rat

IgG1

IgG2a

IgG2b

IgG2c

+

-

-

+++

++

+++

+

+++

++

+++

+

+++

Cow

IgG1

IgG2

+

+++

+++

+++

+++

+++

山羊

Goat

IgG1

IgG2

+

+++

+++

+++

+++

+++

Horse

IgG(ab)

IgG(c)

IgG(T)

+

+

-

-

-

+++

+

+

+++

Rabbit

IgG

+++

+++

+++

Pig

IgG

+++

+

+++

Dog

IgG

+++

+

+++

Chicken

IgY

-

-

-

注(zhu):-表示(shi)不结(jie)(jie)合(he);+表示(shi)微弱(ruo)结(jie)(jie)合(he);++表示(shi)中等结(jie)(jie)合(he);+++表示(shi)很强结(jie)(jie)合(he)。


注意事项:

1)预(yu)填柱(zhu)使用简易方便,在没有仪器设(she)备的条(tiao)件(jian)下也可(ke)以完成纯化任务;

2)样品洗脱后一般(ban)pH很低(di),应(ying)立刻用碱性(xing)(xing)中和缓(huan)冲(chong)液(ye)(ye)(ye)(如(ru)1 M Tris-HCl,pH 9.0)将收集(ji)到的抗(kang)体溶液(ye)(ye)(ye)中和到中性(xing)(xing),或在收集(ji)容器中事先装5% ~ 10%、pH 7.5的缓(huan)冲(chong)液(ye)(ye)(ye)(如(ru)1 M Tris-HCl或1 M 磷酸(suan)缓(huan)冲(chong)液(ye)(ye)(ye)),以利(li)于维持(chi)抗(kang)体的生物活性(xing)(xing),避免(mian)抗(kang)体失活;

3)使用时保证柱(zhu)子(zi)和缓冲液的温(wen)度一致,避免柱(zhu)床内产生气泡,如果已(yi)经产生气泡,可以自行重装(zhuang)柱(zhu)子(zi);

4)多次(ci)使用(yong)(yong)后会有(you)沉淀蛋(dan)白,强疏(shu)水性蛋(dan)白,脂蛋(dan)白,脂质体(ti)等非特异吸附凝(ning)胶上,可以用(yong)(yong)0.1 %去垢剂短时间清(qing)洗(xi)(xi),如0.1% Triton X-100清(qing)洗(xi)(xi)2个柱(zhu)体(ti)积(ji),立即用(yong)(yong)结合缓冲液洗(xi)(xi)5 ~ 10个柱(zhu)体(ti)积(ji)。也(ye)可以用(yong)(yong)70%乙醇清(qing)洗(xi)(xi)作同样清(qing)洗(xi)(xi)。

5)

推(tui)荐流速

预装柱体积ml

1 ml

5 ml

10 ml

流速(ml /min )

0.2

1

2

导购指南

中文(wen)名

英(ying)文简称

货号

规格

产品描述

重力预(yu)装柱

蛋白A/G琼脂(zhi)糖(tang)凝胶FF重力(li)预装柱

PAG NUPharose FF pre-packed column

NRPB13S-Z11

1*1mL

1支*1ml

NRPB13S-Z41

4*1mL

4支(zhi)*1ml

NRPB13S-Z15

1*5mL

1*5mL

NRPB13S-Z25

2*5mL

2支*5mL

AKTA中压预装柱

蛋白(bai)A/G琼(qiong)脂糖凝(ning)胶FF中压(ya)预装柱

PAG NUPharose FF pre-packed column

NRPB13S-Y11

1*1mL

1支*1ml

NRPB13S-Y41

4*1mL

4支*1ml

NRPB13S-Y15

1*5mL

1*5mL

NRPB13S-Y25

2*5mL

2支(zhi)*5mL

填(tian)料

蛋白(bai)A/G琼脂糖凝(ning)胶(jiao)FF

PAG NUPharose FF

NRPB13L-10

10mL

1瓶*10ml

NRPB13L-20

20mL

1瓶*20ml

NRPB13L-100

100mL

1瓶*100ml

NRPB13L-500

500ml

1瓶*500ml

注:纽龙(long)生(sheng)物填料(liao)体积(ji)为实际琼(qiong)脂糖凝胶(jiao)体积(ji)


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