品 名:蛋白A/G琼脂糖(tang)凝胶FF
英文名:Protein A/G NUPharose Fast Flow, Protein AG NUPharose FF
目录号:NRPB13L、NRPB13S(预装柱)
规 格:20 ml,100 ml,1L,1 ml预装柱(zhu),5 ml预装柱(zhu),特殊规格定制
运 输:2 ~ 25℃,常压、避光(guang)
贮 存:20%乙醇,2 ~ 8℃
保质期:3年
相关介绍:
蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)A蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)G琼(qiong)脂糖凝(ning)胶FF是(shi)将重(zhong)组蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)A蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)G融(rong)合(he)(he)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(r-PAG,NRPA14S)键合(he)(he)在琼(qiong)脂糖凝(ning)胶微(wei)球上形(xing)成的(de)亲(qin)和分离介质。与(yu)单独的(de)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)A或蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)G分离介质相比(bi),具有更宽广的(de)结(jie)合(he)(he)范围,可以与(yu)人的(de)所有IgG亚型、IgA、IgE、IgM结(jie)合(he)(he),但不能与(yu)小鼠的(de)IgA、IgM和血清(qing)白(bai)(bai)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)结(jie)合(he)(he),适(shi)合(he)(he)用(yong)于鼠IgG单抗(kang)的(de)提取和检测。同时融(rong)合(he)(he)后的(de)r-PAG降低对pH的(de)依赖,允许(xu)在pH5 ~ 8进(jin)行结(jie)合(he)(he)。
技术指标:
基质 | 4%交联琼脂糖凝胶微球 |
配基 | 蛋白A蛋(dan)白G融合(he)蛋白 |
配基密度 | ≥6 mg/ml |
填(tian)料粒径 | 60 ~ 180 μm |
最大流速(su) | 800 cm/h |
推荐流速 | 20 ~ 100 cm/h |
pH稳定性(xing) | pH 3 ~ 9,pH2 ~ 10(清洗) |
耐反压 | 0.3 MPa |
载量 | ≥ 20 mg/ml IgG |
保存条件 | 2 ~ 8℃保存于20%乙醇溶液中 |
应用举例:
结合缓冲液(ye):20 mM磷(lin)酸缓冲液(ye),150 mM NaCl,pH 7.4
洗脱(tuo)缓冲液:0.1 M Glycine-HCl缓冲液,pH 2.5
中和缓冲液:1 M Tris-HCl,pH 9.0
1)1 ml蛋白(bai)A蛋白(bai)G琼(qiong)脂糖(tang)凝(ning)胶FF预(yu)填柱(zhu)用5 ~ 10个柱(zhu)床体积的蒸馏水洗去保(bao)存液;
2)用结(jie)合缓(huan)冲(chong)液结(jie)合缓(huan)冲(chong)液平(ping)衡 5 ~ 10个柱床体积;
3)将3 ml兔多抗血清(qing)用结(jie)合缓冲液稀释到15 ml,0.45 μm滤(lv)膜过滤(lv)上(shang)样;
4)用结合缓冲液再(zai)洗 5 ~ 10个柱(zhu)床体积(ji);
5)用(yong)洗脱缓(huan)(huan)冲(chong)液洗脱抗体,收集洗脱峰,并用(yong)中(zhong)和缓(huan)(huan)冲(chong)液调节其(qi)pH至(zhi)中(zhong)性(xing);
6)目的抗体洗脱后(hou)用结合缓冲液清(qing)洗5 ~ 10个柱体积平衡柱子(zi);
7)分析洗脱下来的兔多(duo)抗。
种类 Species | 亚型 Antibody Class | 蛋白A Protein A | 蛋白G Protein G | 蛋白A蛋(dan)白G融合蛋白 Protein AG |
人 Human | IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 IgM IgD IgA Fab | +++ +++ + +++ + - + + | +++ +++ +++ +++ - - - + | +++ +++ +++ +++ + - + + |
小鼠(shu) Mouse | IgG1 IgG2a IgG2b IgG3 IgM | + +++ +++ +++ - | ++ +++ +++ +++ - | ++ +++ +++ +++ - |
大鼠 Rat | IgG1 IgG2a IgG2b IgG2c | + - - +++ | ++ +++ + +++ | ++ +++ + +++ |
牛 Cow | IgG1 IgG2 | + +++ | +++ +++ | +++ +++ |
山羊 Goat | IgG1 IgG2 | + +++ | +++ +++ | +++ +++ |
马 Horse | IgG(ab) IgG(c) IgG(T) | + + - | - - +++ | + + +++ |
兔Rabbit | IgG | +++ | +++ | +++ |
猪Pig | IgG | +++ | + | +++ |
狗Dog | IgG | +++ | + | +++ |
鸡Chicken | IgY | - | - | - |
注(zhu):-表示(shi)不结(jie)(jie)合(he);+表示(shi)微弱(ruo)结(jie)(jie)合(he);++表示(shi)中等结(jie)(jie)合(he);+++表示(shi)很强结(jie)(jie)合(he)。
注意事项:
1)预(yu)填柱(zhu)使用简易方便,在没有仪器设(she)备的条(tiao)件(jian)下也可(ke)以完成纯化任务;
2)样品洗脱后一般(ban)pH很低(di),应(ying)立刻用碱性(xing)(xing)中和缓(huan)冲(chong)液(ye)(ye)(ye)(如(ru)1 M Tris-HCl,pH 9.0)将收集(ji)到的抗(kang)体溶液(ye)(ye)(ye)中和到中性(xing)(xing),或在收集(ji)容器中事先装5% ~ 10%、pH 7.5的缓(huan)冲(chong)液(ye)(ye)(ye)(如(ru)1 M Tris-HCl或1 M 磷酸(suan)缓(huan)冲(chong)液(ye)(ye)(ye)),以利(li)于维持(chi)抗(kang)体的生物活性(xing)(xing),避免(mian)抗(kang)体失活;
3)使用时保证柱(zhu)子(zi)和缓冲液的温(wen)度一致,避免柱(zhu)床内产生气泡,如果已(yi)经产生气泡,可以自行重装(zhuang)柱(zhu)子(zi);
4)多次(ci)使用(yong)(yong)后会有(you)沉淀蛋(dan)白,强疏(shu)水性蛋(dan)白,脂蛋(dan)白,脂质体(ti)等非特异吸附凝(ning)胶上,可以用(yong)(yong)0.1 %去垢剂短时间清(qing)洗(xi)(xi),如0.1% Triton X-100清(qing)洗(xi)(xi)2个柱(zhu)体(ti)积(ji),立即用(yong)(yong)结合缓冲液洗(xi)(xi)5 ~ 10个柱(zhu)体(ti)积(ji)。也(ye)可以用(yong)(yong)70%乙醇清(qing)洗(xi)(xi)作同样清(qing)洗(xi)(xi)。
5)
推(tui)荐流速 | |||
预装柱体积(ml) | 1 ml | 5 ml | 10 ml |
流速(ml /min ) | 0.2 | 1 | 2 |
导购指南
中文(wen)名 | 英(ying)文简称 | 货号 | 规格 | 产品描述 |
重力预(yu)装柱 | ||||
蛋白A/G琼脂(zhi)糖(tang)凝胶FF重力(li)预装柱 | PAG NUPharose FF pre-packed column | NRPB13S-Z11 | 1*1mL | 1支*1ml |
NRPB13S-Z41 | 4*1mL | 4支(zhi)*1ml | ||
NRPB13S-Z15 | 1*5mL | 1支*5mL | ||
NRPB13S-Z25 | 2*5mL | 2支*5mL | ||
AKTA中压预装柱 | ||||
蛋白(bai)A/G琼(qiong)脂糖凝(ning)胶FF中压(ya)预装柱 | PAG NUPharose FF pre-packed column | NRPB13S-Y11 | 1*1mL | 1支*1ml |
NRPB13S-Y41 | 4*1mL | 4支*1ml | ||
NRPB13S-Y15 | 1*5mL | 1支*5mL | ||
NRPB13S-Y25 | 2*5mL | 2支(zhi)*5mL | ||
填(tian)料 | ||||
蛋白(bai)A/G琼脂糖凝(ning)胶(jiao)FF | PAG NUPharose FF | NRPB13L-10 | 10mL | 1瓶*10ml |
NRPB13L-20 | 20mL | 1瓶*20ml | ||
NRPB13L-100 | 100mL | 1瓶*100ml | ||
NRPB13L-500 | 500ml | 1瓶*500ml | ||
注:纽龙(long)生(sheng)物填料(liao)体积(ji)为实际琼(qiong)脂糖凝胶(jiao)体积(ji) |